PD-L1 檢測(cè)的準(zhǔn)確性對(duì)于臨床免疫治療人群的選擇以及預(yù)測(cè)免疫治療的療效發(fā)揮重要作用。在前面系列的文章中，我們主要從法規(guī)和行業(yè)要求等角度談到了 PD-L1 檢測(cè)的“快”+“準(zhǔn)”。除此之外，PD-L1 檢測(cè)的“準(zhǔn)”更需要檢測(cè)技術(shù)上的有力保障。本系列將從操作技術(shù)上來談?wù)勅绾伪ＷC PD-L1 檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
質(zhì)量是產(chǎn)品的生命，高質(zhì)量需要非常嚴(yán)格的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)來保證。PD-L1 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性也離不開質(zhì)控。在本篇文章中，我們從質(zhì)控角度來談?wù)勅绾螠?zhǔn)確地進(jìn)行 PD-L1 檢測(cè)。
無論采用全自動(dòng)檢測(cè)平臺(tái)還是實(shí)驗(yàn)室自建檢測(cè)平臺(tái)，都必須進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)控，以保證 PD-L1 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。PD-L1 檢測(cè)的質(zhì)控涉及“室內(nèi)質(zhì)控”和“室間質(zhì)控”，兩個(gè)方面相輔相成，缺一不可。
PD-L1檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控
室內(nèi)質(zhì)控是指實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的質(zhì)量控制，包括組織處理的質(zhì)控、切片環(huán)節(jié)的質(zhì)控、免疫組化所使用的相關(guān)試劑質(zhì)量以及檢測(cè)設(shè)備運(yùn)行等質(zhì)控、免疫組化實(shí)驗(yàn)過程中的質(zhì)控。目前 PD-L1 檢測(cè)是 4 種克隆號(hào)對(duì)應(yīng) 2 種檢測(cè)平臺(tái)（表 1）。因此，當(dāng)進(jìn)行 PD-L1 檢測(cè)時(shí)，首先必需要保證不同克隆號(hào)的 PD-L1 在相應(yīng)的檢測(cè)平臺(tái)上進(jìn)行，不能隨意更換，這樣才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并可直接指導(dǎo)臨床的免疫治療。試劑質(zhì)控主要是抗體的克隆號(hào)是否獲得批準(zhǔn)，抗體的生產(chǎn)批號(hào)和有效期是否符合要求檢測(cè)平臺(tái)等。
此外，室內(nèi)質(zhì)控還需要進(jìn)行染色是否成功的質(zhì)控。免疫組化染色步驟較多，任何一個(gè)步驟發(fā)生問題，都可能導(dǎo)致染色結(jié)果出現(xiàn)假陰性或假陽性，因此，設(shè)置陽性和陰性對(duì)照對(duì)保證染色結(jié)果的可靠具有重要意義。PD-L1 22C3 有 3 個(gè)層面的對(duì)照體系，其中任何一個(gè)對(duì)照樣本中呈現(xiàn)不應(yīng)出現(xiàn)的染色，應(yīng)將患者標(biāo)本的分析結(jié)果視為無效。
系統(tǒng)性能對(duì)照：試劑盒自帶的包含陽性、陰性細(xì)胞株各一個(gè)的切片；
實(shí)驗(yàn)室條件對(duì)照：實(shí)驗(yàn)室自備包含陰性、陽性對(duì)照的組織切片（選用的陽性質(zhì)控組織應(yīng)有弱到中等的 PD-L1 陽性染色，以便能探測(cè)出檢測(cè)體系的輕微變化）；
樣本條件對(duì)照：用試劑盒自帶的 NCR（陰性對(duì)照試劑）取代 22C3 一抗試劑對(duì)患者樣本進(jìn)行檢測(cè)。
PD-L1 檢測(cè)的室間質(zhì)控
室間質(zhì)控是指實(shí)驗(yàn)室外部的質(zhì)量控制，也是保證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)準(zhǔn)確的必要手段之一。目前國內(nèi)外均有不同級(jí)別的室間質(zhì)控，如國內(nèi)各省市根據(jù)自身的情況會(huì)不定期進(jìn)行室間質(zhì)控，病理質(zhì)控評(píng)價(jià)中心（PQCC）已經(jīng)成為國內(nèi)免疫組化質(zhì)控的一個(gè)重要室間質(zhì)控機(jī)構(gòu)。國際上比較認(rèn)可的室間質(zhì)控機(jī)構(gòu)有北歐的 Nordi QC、美國的 CAP 以及英國的 UKNEQAS 等。
病理科可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況參加不同的室間質(zhì)控，從而獲得國內(nèi)外同行的認(rèn)可，最大程度保證 PD-L1 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。下面我們以 Nordi QC 對(duì)肺癌 PD-L1 檢測(cè)的室間質(zhì)控結(jié)果來分析。
在第一輪的 PD-L1 的 Nordi QC 評(píng)估中，68 個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加了首輪評(píng)估，通過率為50%。與實(shí)驗(yàn)室自建的檢測(cè)系統(tǒng)（LDT）比較，伴隨診斷 PD-L1 檢測(cè)顯示非常高的通過率。PD-L1 22C3 的通過率達(dá)到了 92%，而總體 LDT 檢測(cè)方法的通過率僅有 20%。其結(jié)果通常表現(xiàn)為與預(yù)期水平相比，TPS 降低，這是由于通常使用基于酪胺的檢測(cè)系統(tǒng)（OptiView+Expansion, Ventana）對(duì) LDT 分析進(jìn)行不精確校準(zhǔn)造成的。
根據(jù) PD-L1 Nordi QC 的第一輪檢測(cè)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn) LDT 檢測(cè)的 PD-L1 表達(dá)水平明顯低于伴隨診斷，這就提示進(jìn)行 PD-L1 檢測(cè)時(shí)應(yīng)該按照 FDA 批準(zhǔn)的方法進(jìn)行檢測(cè)。室間質(zhì)控可以檢驗(yàn)不同實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平，這樣可以避免由于本身檢測(cè)水平不足，室內(nèi)質(zhì)控而無法發(fā)現(xiàn)的問題。
最后，病理醫(yī)生判讀水平的質(zhì)控也是一個(gè)重要的質(zhì)控因素。病理醫(yī)生的判讀水平直接影響到 PD-L1 檢測(cè)結(jié)果的判讀準(zhǔn)確性，這方面需要通過由專人負(fù)責(zé) PD-L1 判讀，不斷加強(qiáng)培訓(xùn)和考核，從而不斷提高判讀水平，才能得到準(zhǔn)確的 PD-L1 檢測(cè)結(jié)果。
總之，PD-L1 判讀結(jié)果的準(zhǔn)確性涉及到多個(gè)方面，需要多個(gè)方面的質(zhì)控。室內(nèi)質(zhì)控是控制 PD-L1 檢測(cè)成敗的關(guān)鍵，室間質(zhì)控是確保 PD-L1 檢測(cè)準(zhǔn)確性的必要保證，二者結(jié)合起來，才能準(zhǔn)確地進(jìn)行 PD-L1 檢測(cè)。
